三位一体·四方同歌|微量外泌体蛋白质组研究锦囊“泌”技

外泌体是活细胞分泌的直径约30 ~150 nm的双层膜小囊泡，作为细胞间通讯的载体，广泛参与了各类疾病的发生发展。外泌体蛋白作为一种重要的外泌体货物，可以反映母体细胞的生理状态，在细胞间通讯中发挥重要作用。外泌体蛋白可以调节肿瘤和各类疾病发生发展，包括免疫调节、微环境重建、血管生成、上皮间充质转换EMT、疾病进展等。解析外泌体蛋白质的特征可以深入了解外泌体的产生、靶向性和生物学功能，是疾病诊断、预后和治疗的潜在标志物来源。近来基于外泌体蛋白质组的研究备受研究者倾赖。

01 基于质谱的蛋白质组学被广泛用于外泌体蛋白的广筛和定量，但外泌体蛋白质组研究具有很多难点与挑战。用于分离外泌体的方法、外泌体蛋白质组学的制样方法和质谱检测分析方法可能对结果产生强烈影响。

• 外泌体分离方法决定了其纯度，纯度又制约了蛋白检出率。进行外泌体蛋白质谱相关研究时，应该选用什么样的分离方案？

• 外泌体蛋白大多属于微量样本，样本量越少，表面吸附损失越严重。如何基于微量外泌体蛋白获取足够进行质谱上机检测的酶解肽段？

• 质谱检测有很多方法，如基于DDA的lable free蛋白质组和direct-DIA ，应该选择哪种检测方法更有利于提高肽段/蛋白检出数目、定量精度和重现性？

02 相较于常规蛋白组学技术，基于邻位延伸分析技术(Proximity Extension Assay，PEA)的Olink靶向蛋白组学具有更高的检测通量、特异性和灵敏度，其通过抗体对蛋白质的特异性识别，结合抗体末端寡核苷酸序列的扩增，实现对血清、血浆、外泌体等样本中蛋白质的定量分析。外泌体Olink超微量靶向蛋白质组研究时需要解决以下难题：

• 进行外泌体Olink靶向蛋白质组标志物研究时，针对各疾病/研究方向有哪些panel可选择？大panel和小panel更推荐哪种？

• 由于外泌体分离以及获取数量有限，具有低样本量以及低蛋白浓度特点，Olink PEA技术如何解决微量样本低丰度蛋白检出难题？

03 NanoFCM提供了一种快速、高通量、低样本量、多参数的外泌体表征和疾病标志物验证手段，仅需1-2min即可获得外泌体粒径、浓度和蛋白maker表征结果，还可用于不同外泌体纯化方法评估，助力外泌体基础研究和临床转化。基于纳米流式技术平台进行外泌体蛋白质研究时，您是否有以下困惑呢？

• 外泌体分离纯化的效果直接影响下游的应用，如何基于纳米流式技术平台有效评估样本纯度？

• 纳米流式可用于进行微量外泌体样本相关蛋白的表征/验证，需要具备哪些条件？以及可以获得哪些信息？

三位一体·微量外泌体蛋白质组深度研讨会

为此，11月16日下午14:00福流生物将联合恩泽康泰、Olink推出以《三位一体·微量外泌体蛋白质组深度研讨会》为主题的直播活动，此次活动将围绕外泌体蛋白质组研究中的难点及挑战，进行深度探讨，从作为广筛的超微量外泌体蛋白质谱解决方案，到精准靶向检测的Olink超微量蛋白组学创新性研究方案，再到微量外泌体相关蛋白表征验证方案，三位一体；兼有大咖学者分享《Brain》期刊精神分裂症精准诊断预后外泌体蛋白标记物研究成果，四方同歌，为各位学者提供微量外泌体蛋白质组学锦囊“泌”技，以期推动外泌体蛋白质组领域的研究快速发展和临床应用转化。在此诚邀您观看！