福流生物
不同来源外泌体的综合表征
Author: Mika Huang Date: February 7, 2023
一、物理性质：粒径分布和颗粒浓度
不同来源的的细胞外囊泡，在尺寸、形态和生化特性等方面存在着巨大的差异性。对细胞外囊泡在单颗粒水平进行表征，对于深入研究囊泡运输系统、细胞通讯机制以及疾病的早期诊断和治疗等均具有非常重要的意义。另外，为了验证细胞外囊泡的颗粒粒径分布是否具有临床价值，需要对其粒径分布进行重复分析。
二、蛋白质分析
目前，学术界对外泌体的起源还没有一个清晰的定论，许多研究者认为外泌体是在多泡体融合细胞膜时形成的。然而，许多研究方法分离出来的颗粒是细胞外囊泡的混合物。EVs的研究领域还不够成熟，尚没有发现能把EVs的某种亚群与其它成分区分开的特异性的标志物，比如鉴别细胞膜直接分泌的和多泡体融合细胞膜分泌的EVs。早期的研究认为CD9、CD81和CD63是外泌体的特征标志物，随着研究的深入，现在已经很清晰这些跨膜蛋白不能代表外泌体的特征标志物，但是它们在外泌体中存在过表达的现象。国际细胞外囊泡协会（International Society for Extracellular Vesicles, ISEV）认为CD9、CD81和CD63等这些标志物，可以用于区分EVs和非EVs的颗粒。
三、脂质和核酸分析
早期的研究认为，EVs执行蛋白运输功能，特异性靶向受体细胞，交换蛋白和/或脂类引发下游信号事件。2007年，研究人员发现EVs也能够运输核酸，参与细胞之间的通讯。总之，EVs通过膜上的蛋白质和脂类等信号分子，以及膜内包裹的内容物（神经递质、酶、激素和核酸等）在细胞之间的通讯和机体调控中发挥作用。所以除了研究蛋白质的功能以外，有必要在单颗粒水平对EVs的RNA和脂类等进行多参数的综合表征。
