福流生物
低拷贝蛋白的绝对定量
Author: Mika Huang Date: February 21, 2023
在细菌中，存在许多低拷贝的重要的蛋白和转录因子，发展高灵敏的检测分析方法对于低拷贝蛋白的检测具有重要意义。β-半乳糖苷酶是一种在原核和真核微生物体系中最成熟、常用的报告分子。传统的检测方法得到的是大量细菌中β-半乳糖苷酶表达及活性的平均效应，掩盖了细菌之间的表达差异。因此，在单个细菌水平考察β-半乳糖苷酶的表达更有利于了解基因表达的随机性、基因调控以及微生物的生理过程。采用β-半乳糖苷酶的亲脂性荧光底物C12FDG对细菌进行染色，结合荧光底物MUG显色和荧光分光光度计确定每个细菌中β-半乳糖苷酶的平均拷贝数，可将纳米流式检测仪检测得到的荧光统计分布直方图转化为β-半乳糖苷酶的拷贝数及其分布。
利用纳米流式检测仪和亲脂性荧光底物C12FDG，在单细菌水平实现β-半乳糖苷酶的检测。
Biosens. Bioelectron., 2013, 48, 49-55.
