益生菌产品中活/死乳酸菌的快速定量

Author: Mika Huang     Date: February 20, 2023

在特定人群中，益生菌的作用越来越明显，尤以患有坏死性小肠结肠炎和急性感染性腹泻等患者为甚。乳酸菌（lactic acid bacteria, LAB）作为最常用的益生菌，广泛应用于添加益生菌的产品，如酸奶和发酵乳饮料等。为了发挥有益的健康效果，益生菌需要在高细胞计数（至少10⁶ cfu/mL）下存活并产生作用。因此，任何市售的声称有健康益处的益生菌产品应满足最小活菌数。快速准确地量化益生菌产品中的LAB，对益生菌产品的质量保证非常重要。目前，乳制品行业用于评估细菌活力最常用的方法是平板计数法，然而该方法是一种劳动密集型、耗时的方法，且无法检测出不形成菌落但仍有代谢活性的细菌。

该研究方法使用细胞膜渗透性的SYTO 9绿色荧光核酸染料和碘化丙锭（propidium iodide, PI）红色荧光核酸染料，对细菌进行染色，其中PI红色荧光核酸染料只穿透细胞膜受损的细菌。通过纳米流式检测仪，可以检测单个细菌的侧向散射和双色荧光信号，从而对益生菌产品中的活/死乳酸菌进行快速定量。该方法已经成功地应用于不同品牌酸奶和发酵乳饮料中活/死乳酸菌的快速定量分析。

图1. 纳米流式检测仪对高温处理后的牛奶的LAB进行计数

图2. 高温处理后的牛奶中的活/死LAB分析

纳米流式检测仪在检测发酵过程、评估质量以及研究益生菌产品长期储存效果等许多方面，具有潜在的应用前景。

Methods Appl. Fluoresc., 2017, 5(2), 024002.