分离纯化方法评估

Author: Mika Huang     Date: February 15, 2023

细胞外囊泡（extracellular vesicles, EVs）具有多种生物学功能，可参与机体免疫应答、抗原递呈、细胞迁移、细胞分化、肿瘤侵袭等，在多种疾病和生理过程中扮演重要的角色。限制EVs发展的挑战之一是缺乏公认的EVs分离的有效方法。在这项研究中，作者选取血浆、细胞上清、尿液三种典型样本作为EVs的来源，对比超速离心（UC）、沉淀（Precipitation）、尺寸排阻加超滤（SEC+UF）、微流控（Exodisc）等纯化方法，通过纳米流式检测技术对分离的EVs进行得率、纯度、表面蛋白表达分析综合评估它们的纯化效果，最后基于样本类型和下游应用，对分离纯化方法的选择提出了切实可行的建议。

                                                                                     图1. 不同纯化方法获得的EVs颗粒浓度                                                         图2. EVs颗粒蛋白比（纯度）分析 

                                                                  图3. 密度梯度离心分析EVs纯度图                                                                                  图4. EVs表面蛋白标志物分析

图5. 基于样本来源和下游应用选择合适的EVs分离方法

该研究中，作者通过纳米流式检测技术对EVs进行多参数的表征，评估适合不同样本类型的纯化方法，总结出基于样本来源和下游应用的不同选择适合的纯化方法的结论，并提供了切实可行的建议。

J Extracell Vesicles, 2020, 10(2):e12044.