线粒体是细胞的能量工厂,在真核细胞的进化中发挥着重要作用。此外,线粒体还与细胞内的信号转导密切相关,如自噬、细胞死亡、自然免疫等。多种复杂的人类疾病都是由线粒体的功能异常导致的,包括神经退行性疾病和新陈代谢紊乱。因此,线粒体研究对于基础生命科学研究意义重大。传统流式细胞仪因缺乏足够的灵敏度,在单个线粒体的分析检测方面仍然受到很大的限制。
在纳米流式检测仪上,分别采用NAO和SYTO 62 对线粒体内膜上的心磷脂和基质中线粒体核酸(mtDNA)进行特异性标记,通过对单个线粒体的散射、内膜心磷脂、mtDNA的同时检测可实现线粒体的纯度和内膜结构完整性的考察;通过外膜穿孔蛋白(porin)蛋白和膜间隙cyt c蛋白的同时检测能够对线粒体的外膜和功能的完整性进行快速表征。
纳米流式检测仪通过对单个线粒体的散射、外膜穿孔蛋白(porin)和膜间隙cyt c 蛋白的同时检测能够对线粒体的外膜和功能的完整性进行准确的考察。在单线粒体水平表征结构完整性、进行蛋白核酸的检测,将为线粒体介导的细胞凋亡信号转导研究提供先进的分析手段。
Anal. Chem., 2012, 84(15), 6421-6428.