福流生物
Author: Mika Huang Date: February 20, 2023
一、粒径分布和颗粒浓度分析
阿霉素脂质体的粒径分布表征通常需要使用冷冻透射电镜和复杂的三维重构技术，需耗时2-3天且获取的粒径分布结果统计代表性不高。另一方面，单个颗粒包裹阿霉素的效率则无法评估。使用纳米流式检测仪对阿霉素脂质体Doxoves的悬液进行测定，借助粒径标准品，仅需2-3分钟的时间即实现了阿霉素脂质体粒径分布、颗粒浓度和阿霉素包裹效率的定量表征。而且，可在单颗粒水平进一步对粒径和包裹阿霉素的含量进行相关分析。
二、载药率和载药量分析
脂质体是一种微小的囊泡，其组成成分与细胞膜相同。脂质体纳米药物是目前临床上最受认可的载药系统。这里，纳米流式检测仪用于单个脂质体颗粒的散射光和荧光信号的快速、同时测定。为了解决脂质体折射率的尺寸依赖性问题，我们合成并表征了不同粒径的阿霉素脂质体作为粒径校准标准，同时测量其颗粒粒径和药物包裹量。这个方法为脂质体囊泡的多参数表征提供了一个高度实用的平台。
Author: Mika Huang Date: February 20, 2023
近期，结合诊断和治疗特点的刺激响应性纳米治疗系统引起了研究者们的极大兴趣。然而，大多数研究主要集中在纳米材料的新颖性上，单颗粒表征的重要性却受到了低估，后者的重要性体现在其可以为性能评价和异质性评价提供详细的物理和生化信息。由于纳米颗粒粒径小，功能性分子含量低，因此，对单个刺激响应纳米颗粒的高通量和多参数分析仍然具有挑战性。该研究制备了一种活性氧（ROS）响应性的脂质体（Lipo@BODIPY11），并以其为例，报道了一种利用纳米流式检测仪表征纳米颗粒的方法。光散射和荧光强度的同时检测为脂质体的质量评价提供了一种手段。可以在几分钟内快速获得以刺激反应能力和ROS治疗后的药物释放行为为指标的临床表现。此外，本方法还揭示了脂质体与功能模块的解离和高度修饰程度下形成聚集体，而这些过程在系综平均法下会被掩盖。该方法为生物化学纳米传感器和诊断纳米材料的原理验证研究、异质性评价和质量控制提供了一种综合的手段。
图1. 纳米流式检测仪表征Lipo@BODIPY11
图2. 包裹阿霉素的脂质体样品的多参数定量分析
基于纳米流式检测技术平台，可发展用于分析具有荧光响应模块的纳米药物，并且可以进一步检测内在荧光或可以被荧光标记的被包封的治疗组分，例如蛋白质和核酸。
Biosens. Bioelectron., 2019, 131, 185-192.
Author: Mika Huang Date: February 20, 2023
在纳米药物表面偶联与靶细胞受体特异性结合的配体改变药物在体内的分布和药物动力学特性是实现其肿瘤精准靶向递送的重要手段，该方法也被称之为肿瘤主动靶向策略。本研究基于纳米流式检测技术建立了一种新型的配体靶向修饰和密度定量表征策略，同时探索了配体加入量、偶联策略以及高聚物链的长度等因素对叶酸修饰的脂质体配体密度的影响。对三种不同靶向配体修饰的脂质体，定量阐明了活性配体密度和细胞靶向能力之间的关系。该方法在纳米药物主动靶向研究中具有普遍适用性。
图1. 基于NanoFCM的脂质体表面叶酸配体密度 图2. 配体密度对靶向能力的影响
转铁蛋白和HER2抗体偶联脂质体的最佳配体密度分别为每100 nm2 0.7个和0.2个，该结果与绝大多数天然病毒表面的刺突蛋白密度相近。基于纳米流式检测技术平台，考察多种制备条件对脂质体表面配体修饰效率的影响。
ACS Nano, 2022, 16(4), 6886-6897.
