食品中的细菌 – 福流生物

饮用水、茶饮中细菌总数的检测

Author: Mika Huang Date: February 20, 2023

饮用水的安全对人类的健康至关重要，而饮用水中细菌的数量是直接反映水质的一个指标，因为细菌的数量在一定程度上反映了饮用水中病原菌数。目前，饮用桶装水已相当普遍，而桶装饮用水在启封后至饮用完毕的一段时间内，其水质变化尤其是细菌数量的变化情况引起人们的关注。实际工作中经常以检验细菌菌落总数来间接判断水的卫生学质量，这种方法往往需要数天时间，且不能检测活的不可培养状态（Viable But Non-Culturable, VBNC）的细菌。使用核酸染料PicoGreen对细菌进行染色，非细菌的杂质颗粒由于没有核酸而无法被染色，能够在纳米流式检测仪上同时产生散射和荧光信号的颗粒则为细菌。纳米流式检测技术用于饮用水和茶饮中细菌的快速检测，不仅缩短了检测时间，而且能成功检测出活的非可培养状态的细菌。

结合PicoGreen核酸染色，纳米流式检测仪可以对饮用水和茶饮中的细菌进行浓度计数，计数结果与传统的菌落计数法具有良好的一致性。与传统的基于细菌活性的菌落计数方法相比，纳米流式检测技术不仅缩短了检测时间，且成功检测出活的非可培养状态的细菌。

Anal. Methods, 2015, 7(7), 3072-3079.

益生菌产品中活/死乳酸菌的快速定量

Author: Mika Huang Date: February 20, 2023

在特定人群中，益生菌的作用越来越明显，尤以患有坏死性小肠结肠炎和急性感染性腹泻等患者为甚。乳酸菌（lactic acid bacteria, LAB）作为最常用的益生菌，广泛应用于添加益生菌的产品，如酸奶和发酵乳饮料等。为了发挥有益的健康效果，益生菌需要在高细胞计数（至少10⁶ cfu/mL）下存活并产生作用。因此，任何市售的声称有健康益处的益生菌产品应满足最小活菌数。快速准确地量化益生菌产品中的LAB，对益生菌产品的质量保证非常重要。目前，乳制品行业用于评估细菌活力最常用的方法是平板计数法，然而该方法是一种劳动密集型、耗时的方法，且无法检测出不形成菌落但仍有代谢活性的细菌。

该研究方法使用细胞膜渗透性的SYTO 9绿色荧光核酸染料和碘化丙锭（propidium iodide, PI）红色荧光核酸染料，对细菌进行染色，其中PI红色荧光核酸染料只穿透细胞膜受损的细菌。通过纳米流式检测仪，可以检测单个细菌的侧向散射和双色荧光信号，从而对益生菌产品中的活/死乳酸菌进行快速定量。该方法已经成功地应用于不同品牌酸奶和发酵乳饮料中活/死乳酸菌的快速定量分析。

图1. 纳米流式检测仪对高温处理后的牛奶的LAB进行计数

图2. 高温处理后的牛奶中的活/死LAB分析

纳米流式检测仪在检测发酵过程、评估质量以及研究益生菌产品长期储存效果等许多方面，具有潜在的应用前景。

Methods Appl. Fluoresc., 2017, 5(2), 024002.

果汁中细菌的无标记检测

Author: Mika Huang Date: February 20, 2023

在食品安全控制中，对果汁中的微生物污染物进行快速定量分析是非常有必要的。然而，由于样品基质的复杂性和细菌污染物的多样性，对果汁中的微生物污染物的定量分析仍具有巨大挑战。该研究报道了一种利用纳米流式检测仪对果汁中的细菌进行无标记检测的方法，细菌中的弱自发荧光可用于细菌的鉴定。优化预处理方案可以减少荧光背景，裂解残留的植物细胞和碎片，可以提高果汁中细菌的回收率。该方法已经成功地应用于市售的新鲜橙汁和苹果汁的细菌检测，其在果汁工业的质量控制和水体微生物检测方面具有广阔的应用前景。

纳米流式检测仪通过自发荧光检测细菌的结果与平板培养的方法相比具有良好的一致性，相关指数R²＞0.97。但其效率远高于平板计数法，样品预处理和测试分析可以在一个小时内完成。

Anal. Chem., 2020, 92(3), 2393-2400.