脂质和核酸分析

Author: Mika Huang     Date: February 14, 2023

早期的研究认为,EVs执行蛋白运输功能,特异性靶向受体细胞,交换蛋白和/或脂类引发下游信号事件。2007年,研究人员发现EVs也能够运输核酸,参与细胞之间的通讯。总之,EVs通过膜上的蛋白质和脂类等信号分子,以及膜内包裹的内容物(神经递质、酶、激素和核酸等)在细胞之间的通讯和机体调控中发挥作用。所以除了研究蛋白质的功能以外,有必要在单颗粒水平对EVs的RNA和脂类等进行多参数的综合表征。

通过膜染料对EVs进行染色,从而对EVs的脂质进行分析,可以区分EVs和其他无膜结构的颗粒。通过核酸染料标记的方法,可以进行单个EVs中RNA的定量分析。这里通过可跨膜的SYTO RNASelect绿色荧光染料标记EVs内部携载的mRNA和miRNA等核酸分子,利用PKH26膜染料标记EVs表面的脂类。

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图1. 纳米流式检测仪分析细胞上清中提取的EVs的RNA

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2. 纳米流式检测仪分析血浆来源的EVs的脂质

结合合适的标记手段,纳米流式检测仪也可以研究外泌体内部的神经递质、酶及其它内容物分子。

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