由于细胞外囊泡(extracellular vesicles, EVs)在疾病诊断以及治疗领域的巨大潜力,被视为液体活检和药物递送的明日之星。围绕这些小囊泡的基础研究持续升温,在工业界亦是炙手可热。但是,EVs的来源环境往往极其复杂,如细胞培养上清、血液、尿液以及腹水等生物体液,其自身在粒径、组成成分等方面与杂质颗粒存在重叠,如何从复杂环境中纯化得到高质量的EV样本,一直是该领域面临的重要挑战。
目前在血浆等体液来源外泌体的研究中,差速离心结合密度梯度离心的方法是当前最广泛使用的高纯度外泌体分离方法。但该方法耗时长、操作繁琐、难以平衡颗粒得率和产物质量且过高的离心力不可避免地对EV的完整性和组成成分造成不同程度的影响。因此,这些因素限制了该方法向临床应用和工业界的转化。
图1. 基于电镜及NanoFCM的EVs单颗粒表征
研究人员结合免疫印迹、TEM和NanoFCM等多种表征方法,通过对FFE法进行优化,实现了从组成成分高度复杂的体液样本中快速、高通量地分离纯化得到EVs。结合NanoFCM检测平台,有望进一步实现EVs相关生物标志物的检测,从基础研究到临床应用均展现出巨大潜力。
Journal of Extracellular Biology, 2022, 1, e71.